NIBSC标准品 09/138 遗传参考小组(用于通过RQ-PCR定量BCR-ABL易位)

品牌：英国NIBSC标准品

CRM code（货号）：09/138

英文名称：Genetic Reference Panel, for the quantitation of BCR-ABL translocation by RQ-PCR (1st I.S.)

描述：遗传参考小组，用于通过RQ-PCR定量BCR-ABL易位

产品用途：

       2009年，世界卫生组织（世界卫生组织；NIBSC产品代码09/138）生物标准化专家委员会（ECBS）成立了第一个世界卫生组织BCR-ABL1 mRNA定量国际遗传参考小组[1]。该小组由四个单独编码的标准品/安瓿组成，每个安瓿都含有冻干细胞。根据所使用的对照基因，每种标准在国际标度（BCR-ABLIS）上对BCR-ABL1都有不同的定义值。它们一起用作试剂盒、分析和二级标准校准的主要标准（见第7节）。材料不应被用于任何其他用途。请注意，这些材料仅在国际标准（IS）的0.01%至10%范围内用于BCR-ABL1 mRNA检测。它们尚未被验证用于其他直接应用，例如IS测量>10%，或直接确定分析灵敏度<0.01%，尽管这些可以通过推导二级标准来确定（见第7节）。这些材料包含BCR-ABL1 e14a2转录本（也称为b3a2）；在使用前，应验证其对最终用户测定中包括BCR-ABL1 e13a2（b2a2）在内的其他转录物的定量适用性，例如通过确保转录物的PCR扩增同样有效。

NIBSC标准品 09/138 遗传参考小组(用于通过RQ-PCR定量BCR-ABL易位)

该小组在一项涉及10个实验室的国际合作研究中进行了测试，并使用三种zui常用的对照基因获得了4种主要标准中每种的BCR-ABL1IS平均值。

使用说明：

在复溶之前，不应尝试称量冻干材料的任何部分。

在继续之前，请阅读第3-5页上建议的测定和二级标准校准方法。

如果您正在校准二级标准品，请提取RNA，制备cDNA，并在与一级标准品同时测试该cDNA。这将使您能够确定二级标准的IS值。

a.按照第6节所述打开安瓿。上面。

b.在室温下用1ml Trizol、600µl RLT缓冲液或其他RNA提取系统的等效物复溶每种冻干材料。

c.确保用移液管jian端或针头反复抽吸以溶解所有细胞。孵育5分钟。

d.将每个安瓿的全部内容物转移到无核酸酶试管中。

e.用你常用的方法从4种材料中提取RNA。

f.使用您常用的方法为4种RNA材料中的每一种制备cDNA。（如果按照建议的方法，从每种RNA材料中制备2批cDNA；见第3页）。

g.使用您常用的方法确定cDNA材料的BCR-ABL1/对照基因值百分比。

h.通过分析这些材料的观察值与预期值，确定BCR-ABL1测定的校正系数，以报告IS。

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