NIBSC 22/132 流感血凝素抗体血清标准品的产品分析

NIBSC 22/132 流感血凝素抗体血清标准品的产品分析

品牌：英国NIBSC标准品

CRM code（货号）：22/132

英文名称：Influenza anti-B/Phuket/3073/2013-like (B Yamagata lineage) HA serum

描述：流感血凝素抗体血清标准品

产品用途：

使用适当的NIBSC抗原试剂制备流感抗血清试剂22/132，用于B/Phuket/3073/2013样抗原的单次径向扩散测定。

使用B/Phuket/3073/2013样病毒的纯化HA在绵羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797中制备抗血清试剂。HA抗原通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取，并通过在蔗糖梯度上沉淀纯化（Brand，CN和Skehel，JJ，Nature，New Biology，1972，238145-147）。

生物材料原产国：英国。

绵羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797的免疫接种计划如下：肌肉注射一剂约100微克的B/Phuket/3073/2013病毒HA和弗氏wan全佐剂（FCA），两周后注射50微克的B/Puket/3073/2013，包括弗氏不wan全佐剂（FIA）。对于SH792、SH795和SH797，一周后再给予两剂50微克剂量的B/Phuket/3073/2013 HA，包括FIA。对于SH793、SH794和SH796，一周后再给予三剂50微克剂量的B/Phuket/3073/2013 HA，包括FIA。初次免疫六周后，收集血清并加入 sodium azid（0.05%w/v）。

为了灭活口蹄疫病毒，抗血清通过维持pH 5.5（或更低）至少30分钟进行处理，然后恢复到原始pH值。

将从绵羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797获得的抗血清合并，用含有 sodium azid（0.05%w/v）的PBS缓冲液稀释1:5，并装入2ml体积的小瓶中。

材料的使用：

对于1ml中含有20-50微克HA活性的抗原的测定，应将约15-25ul的未稀释试剂加入1ml琼脂糖中。可能需要根据使用的B/Phuket/3073/2013类抗原标准或当地实验室条件改变抗血清浓度。抗血清试剂22/132应按照Wood，JM，Schild，GC，Newman，RW和Seagroatt，VA描述的方法使用。生物标准化杂志，1977，5，2。

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